数字PCR(Digital PCR,dPCR)是一种灵敏且精准的核酸绝对定量手段,被称为第三代PCR技术。与传统分子诊断技术相比,数字PCR的优势在于具有高度的灵敏度,可以实现单分子级检测;无需使用任何标准品或标准曲线,也无需借助Ct值进行比较,即可实现对核酸靶标的绝对定量;具备高稳定性和较强的抗干扰能力,适用于多种复杂样本。
但当前数字PCR在临床上尚未有重量级的应用,其原因主要有以下几点:第一,早期数字PCR仪操作流程复杂;第二,早期数字PCR仪稳定性低;第三,使用成本高;第四,大多数字PCR仪尚未取得医疗器械许可证;第五,用户对数字PCR了解不足。基于此,众多数字PCR厂家不断进行技术迭代,而一体化的实现使数字PCR进入“2.0时代”,一体机的设计减少了手工操作的时间,更好地符合了临床医生的使用习惯,也减少了仪器的占地面积,使数字PCR可以更加适应临床应用。
近期,多家数字PCR厂商推出了数字PCR一体机,紧跟数字PCR时代浪潮。以下是小编盘点的近半年部分主流数字PCR厂商推出的数字PCR一体机。
领航基因
Pilot1200
全新一代小型数字PCR一体机Pilot1200集核酸提取纯化、体系构建、液滴生成、PCR扩增和阅读分析为一体,TAT (Turn⁃Around⁃Time,即检验结果回报时间,是指从医嘱申请到结果发送时间的整个过程)最快需60分钟,具备独家七色荧光通道,降低实验成本,属于桌面式小型操作系统。
思纳福
Sniper DQ48全自动数字PCR一体机
采用微滴振动注射技术,在DQ24的基础上对性能和通量进行了升级改造,使其检测通量达到48个。
臻准
AccuONE-R300
采用微腔芯片式微滴制备方式,通过物理分隔生成反应单元,扩增阅读一体化。配置双独立温控模块,采用6个独立的LED光源和CMOS相机进行平面拍照分析,大于6个独立荧光检测通道(Atto425、FAM、VIC/HEX、ROX、CY5、CY5.5),样本检测时长≤2分钟/1个;≤60分钟/30个,样本通量≥60个。
永诺医疗
微滴式数字PCR MicroDrop-ONE
微滴数量可达到10-25万,具有6色荧光通道(ATTO425、FAM、HEX、ROX、Cy5、Cy5.5),样本通量可达到112个。该产品可以进行加急检测,检测时长为一个小时。
小海龟
SCI Digital PCR
基于“固态油隔水”数字PCR技术,该仪器相较于上一款产品更加的mini(453×498×490 mm),但依然可以实行超重检测(>10重)。
小结:今年上半年,国产数字PCR 厂家在技术路线创新方向上各有不同,但总体上来说数字PCR都在朝着高通量、一体化、低成本的方向发展。后疫情时代,有些早期数字PCR厂家已经将核酸提取功能融入到数字PCR一体机中,这会成为今后提高自动化的又一技术研发方向吗?与国产企业新品争相亮相形成鲜明对比的是,国外企业在今年上半年推出的数字PCR新品寥寥无几,这是否意味着一体机热潮之后的数字PCR技术创新来到瓶颈了呢?